A microscopia pode ser realizada rapidamente, mas a acurácia depende da experiência do microscopista e da qualidade do equipamento. Regulamentos muitas vezes limitam os médicos quanto ao uso de microscópio para propósitos diagnósticos em laboratórios não certificados. Show
O exame microscópico do tecido pode ser necessário para distinguir doença invasiva de colonização de superfície—a distinção não é facilmente alcançada por métodos de cultura. Como a detecção por microscopia geralmente requer uma concentração microbiana de pelo menos 1 × 104-5/mL, a maioria das amostras de líquidos fisioógicos (p. ex., líquido cerebrospinal) são concentradas (p. ex., por centrifugação) antes de fazer o exame. A coloração de Gram:
Essas características podem orientar a terapia antibiótica, enquanto se aguarda a identificação definitiva. Encontrar uma mistura de microrganismos com várias morfologias e diferentes características pela coloração de Gram sugere amostra contaminada ou infecção bacteriana polimicrobiana. Encontrar muitas células escamosas em uma amostra de escarro sugere que a amostra está contaminada por saliva e, portanto, sua utilidade diagnóstica é limitada. Para realizar a coloração de Gram, o espécime é fixado pelo calor a uma lâmina e corado por exposição sequencial ao cristal violeta do Gram, a iodo, a descolorante e contracoloração (tipicamente, safranina). Essas colorações são usadas para identificar:
Embora a detecção de micobactérias em escarros necessite pelo menos 10.000 organismos/mL, as micobactérias estão, na maioria das vezes, presentes em níveis menores, de forma que a sensibilidade é limitada. Geralmente, alguns mL de escarro são descontaminados com hidróxido de sódio e concentrados por centrifugação para coloração álcool-ácido resistente. A especificidade é maior, embora alguns microrganismos moderadamente álcool-ácido resistentes sejam de difícil distinção das micobactérias. Os corantes fluorescentes permitem a detecção de concentrações menores (< 1 × 104 células/mL). Exemplos são
Associando um corante fluorescente ao anticorpo de um patógeno (imunofluorescência direta ou indireta), teoricamente, a sensibilidade e a especificidade devem aumentar. Entretanto, a leitura e interpretação desses testes, e poucos (p. ex., testes de Pneumocystis e Legionella) testes fluorescentes diretos para anticorpos estão comercialmente disponíveis e são usados comumente. Amostras a fresco sem corantes podem ser usadas para detectar, via microscopia de campo escuro, os seguintes microrganismos: Para aumentar a visibilidade dos fungos, hidróxido de potássio (KOH) a 10% pode ser aplicado para dissolver tecidos circundantes e organismos não fúngicos. Essas colorações de prata são usadas para visualizar bactérias como Essas colorações são usadas para detectar:
São utilizadas para detectar protozoários intestinais. A coloração de Gomori-Wheatley é usada para detectar microsporídios. A coloração de Gomori-Wheatley pode não dectetar ovos de helmintos e larvas e não identifica confiavelmente Cryptosporidium. Fungos e células humanas absorvem a coloração. A coloração com hematoxilina férrica cora diferentemente células, inclusões e núcleos. A coloração para ovos de helmintos pode ser muito escura para permitir a identificação. Clique aqui para acessar Educação para o paciente O microscópio é um instrumento que permite visualizar objetos demasiado pequenos para serem observados a olho nu. Na área da saúde, é utilizado em laboratórios para efetuar diagnósticos a partir de biópsias ou de outras amostras biológicas. De um modo geral, os microscópios são constituídos por um sistema de lentes que ampliam a imagem dos objetos observados. Há, ainda, microscópios clínicos e/ou cirúrgicos, que são usados para ampliar uma área do corpo do paciente e, assim, permitir ao médico ou cirurgião trabalhar com maior precisão. Utilizam-se no âmbito da microscopia cirúrgica e não serão abordados no presente guia. Microscópios: ver produtos
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